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先前研究表明,用作供体底物的酮糖可以被酮酸---酸(hpa) 取代,通过释放---使反应不可逆。因此,tk似乎是一种---的酶,用于不对称合成α----酮方案。当hpa作为供体时,tk对非磷酸化短碳链α----醛(c–c)表现出活性。此外,tk优先接受(r)----醛,产生 (s, r)α----酮。发现并表征了来自嗜热脂肪地芽孢 (tkgst)的个热稳定tk,在高温下表现出高稳定性和对异常反应条件的---性。使用合理的诱变方法将---化或非---化醛作为受体 (,) 和脂肪族 α-酮酸作为供体,提高和扩大了 tkgst 底物特---及其对映体偏好,确认了工程化的tkgst,cas:84434-05-9销售---,其能够促进了脂肪族受体和供体底物组合的脂肪族α----酮 (c-c) 的合成。
随后基于这些结果,研究了tk反应的可逆性模拟逆偶环缩合,用于用适当的 tkgst 变体裂解脂肪族 α----酮方案 b。构建tkgst突变体库在戊糖磷酸途径中,磷酸化醛糖 (c-c)和酮糖 (c-c) 分别是tk的受体和供体底物。为了提高tkgst对非磷酸化α----酮- 的活性表,根据通过位点饱和诱变 (ssm) 进行的半合理诱变在目标位置修改了tkgst活性位点。tksce、tkec和来自的tk (tkban) 等微生物tk的d结构具有很强的蛋白质序列同源性。稳定tk 底物的关键残基是相同的,并且与thdp具有相似的方向。
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